豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體高校研究

腸肝菌-志賀樣毒素Ⅱ型變異體，又名豬水腫素（Shiga-Like Toxin Type II Variant），為病原性大腸肝菌的毒素-SLT-IIe屬于類(lèi)志賀氏毒素家族成員。該毒素與其家族其他成員有著較高的同源性，SLT-IIe為VTEC(或SLTEC)所產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)性質(zhì)的細(xì)胞毒素，是引起人和動(dòng)物出血性腹瀉和豬水腫病（仔豬、羊）的主要毒力因子。常見(jiàn)病原菌的血清型是O139。
豬水腫素主要引起豬水腫病又名豬胃腸水腫。是由病原性大腸肝菌的毒素引起斷奶仔豬的一種急性散發(fā)性疾病。主要表現(xiàn)為突然發(fā)病，運(yùn)動(dòng)共濟(jì)失調(diào)，驚厥，局部或全身麻痹及頭部水腫。剖檢變化為頭部皮下，胃壁及大腸間膜的水腫。

豬水腫素(O139)菌體蛋白抗體高校研究

  Shiga-Like Toxin Type II Variant.

一、凍干多肽的溶解
1、多肽溶解的主要問(wèn)題是二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成。雖然疏水肽鏈二級(jí)結(jié)構(gòu)的形成更明顯，但除zui短的肽鏈外，此現(xiàn)象產(chǎn)生在幾乎所有肽鏈,與極性無(wú)關(guān)。所以，溶解多肽的*個(gè)原則是使用無(wú)菌蒸餾水或去離子水，當(dāng)然無(wú)氧水。多肽溶液可能遇到細(xì)菌降解，為防止此情況的發(fā)生，應(yīng)溶解在無(wú)菌的蒸餾水中或用0.45或0.2孔徑的濾膜過(guò)濾除菌。含有Cys、Met、Trp的多肽很容易氧化，應(yīng)溶于無(wú)氧的水中，無(wú)氧水可通過(guò)注入惰性氣體（氮、氦、氬）減壓除氣得到；
2、若多肽不溶于純水，超聲處理有助于打碎顆粒并增加溶解度。注意:超聲處理會(huì)引起溶液發(fā)熱或多肽降解；
3、若多肽含有多個(gè)堿性氨基酸，使用（1-10%）的乙酸水溶液：對(duì)于疏水性強(qiáng)的多肽，應(yīng)使用50%的乙酸；
4、若多肽中含有大量酸性氨基酸，可用氨溶液（1-10%）或乙酸乙基嗎啡或重碳酸鹽等揮發(fā)性的堿性緩沖液溶解。pH值在層析前必須調(diào)整；
5、異丙醇和乙腈能溶解中等大小的多肽。若肽要上柱，有機(jī)溶劑的量必須很少否則將嚴(yán)重影響停留時(shí)間；
6、若多肽因含有Val、Leu、Met、Phe、Tyr、Ala等芳香鏈而高度疏水、或?yàn)橹行噪臅r(shí)，DMF或DMSO等膜變性劑的使用，有利于多肽的溶解：
a.高濃度模變性劑通過(guò)破壞多肽的二級(jí)結(jié)構(gòu)而助溶；
b.膜變性劑適于多肽分析液的制備，但可能會(huì)對(duì)其生物活性的研究工作造成干擾；
c.DMF是變性劑（zui高濃度可達(dá)30%），滴加至多肽溶解；
d.反相層析法時(shí)，DMF將與洗脫液前鋒一起流出，根據(jù)入量的多少，峰值可能很高。大多數(shù)肽能在大量DMF流出后幾分鐘內(nèi)流出，若肽鏈很小，洗脫太早，多肽的量將很低。
二、凍干多肽的保存
標(biāo)有“凍干保存”說(shuō)明的多肽應(yīng)該保存在冰凍條件下，以-20℃以下，其活性可保持多年。當(dāng)使用干凍產(chǎn)品時(shí)，開(kāi)蓋前其容器應(yīng)在裝有新鮮干燥箱內(nèi)升至室溫。-20℃的產(chǎn)品，此過(guò)程需要一小時(shí)或更長(zhǎng)，隨保裝而定。否則，當(dāng)容器打開(kāi)，水氣進(jìn)入導(dǎo)致凝縮而降低穩(wěn)定性。一旦打開(kāi)，應(yīng)迅速稱(chēng)量完畢，立即封閉以免潮解，親水肽更應(yīng)注意。
三、溶解多肽的保存
多肽溶液比干粉的穩(wěn)定性差很多，為了獲得較好的效果，遵循以下原則：
1、分成小包裝避免反復(fù)凍融。使用多少解凍多少；
2、溶于pH5-7無(wú)菌的緩沖液中，-20℃儲(chǔ)存；
3、由于細(xì)菌能降解多肽，儲(chǔ)存前應(yīng)過(guò)濾細(xì)菌；
4、包含Cys、Met、Try、Glu、Asp的多肽易于氧化，因此應(yīng)保存在無(wú)氧化劑的環(huán)境中。
我公司免費(fèi)提供抗血清親合層析純化服務(wù)，得到目的蛋白的抗體IgG。
我公司還免費(fèi)提供真空冷凍抽干服務(wù)，得到凍干粉狀的抗體IgG產(chǎn)品，以便產(chǎn)品的使用及長(zhǎng)期保存。
制備要求：客戶(hù)需提供制備抗體的相關(guān)蛋白的英文名稱(chēng)的全稱(chēng)，也可同時(shí)提供該蛋白的全序列或氨基酸（多肽片斷）序列，供參考(不要求) 制備時(shí)間：2.5-3個(gè)月左右
制備流程：簽訂制備合同——付首付款——制備抗體——付清全款——免費(fèi)將抗體寄給客戶(hù)
抗體制備
抗體產(chǎn)量：1、20ml兔多克隆抗體血清原液（小鼠為5ml腹水）
2、經(jīng)親和層析純化抗體IgG 10mg
3、多肽抗原3mg（用于客戶(hù)自行檢測(cè)抗體使用）
抗體效價(jià)：1：8000以上（ELISA）
說(shuō) 明 書(shū)：提供抗體制備報(bào)告及抗體使用說(shuō)明書(shū)
抗原要求：若客戶(hù)提供通過(guò)基因工程表達(dá)的抗原，則要求：抗原純度85%以上，分子量大于10KDa，抗原量12-13mg
產(chǎn)品包裝：免費(fèi)真空冷凍抽干，zui終為您提供易于保存的凍干粉產(chǎn)品

Anti-MAGE-1/HLA-A1 protein /FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記黑素瘤抗原-1抗體IgG    RSF-1369R     100ug/200ug
Anti-MAP1A/Mtap1a /FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白1A抗體IgG    RSF-1020R     100ug/200ug
Anti-MAP1LC3A/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體IgG    RSF-1319R     100ug/200ug
Anti-MAP-2/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記微管相關(guān)蛋白2抗體IgG    RSF-1041R     100ug/200ug
Anti-MAPK1/ERK3/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶3抗體IgG    RSF-0223R     100ug/200ug
Anti-MAPK4/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶4抗體IgG    RSF-1977R     100ug/200ug
Anti-MAPKK1 /FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體IgG    RSF-1978R     100ug/200ug
Anti-MAPKK2 /FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體IgG    RSF-1979R     100ug/200ug
Anti-MKK4/MAP2K4/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體IgG    RSF-2659R     100ug/200ug
Anti-MKK7/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶激酶7抗體IgG    RSF-1723R     100ug/200ug
Anti-MKK7/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記絲裂原活化蛋白激酶MKK7IgG    RSF-1980R     100ug/200ug
Anti-MARCO/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記巨噬細(xì)胞清道夫受體抗體IgG    RSF-0531R     100ug/200ug
Anti-MASP/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記抗MBL相關(guān)絲氨酸蛋白酶抗體IgG    RSF-1976R     100ug/200ug
Anti-MASP2/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶2抗體IgG    RSF-0380R     100ug/200ug
Anti-Matriptase/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記兔抗蛋白裂解酶抗體IgG    RSe-0380R     100ug/200ug
Anti-Matrilin 1/CMP/FITC熒光抗體  熒光素標(biāo)記軟骨基質(zhì)蛋白抗體IgG    RSF-1352R     100ug/200ug